蛋白组酶切总翻车?两款质谱级重组蛋白酶,降低漏切率,提升鉴定深度

2026-09-21 15:23 来源:丁香园 作者:逸微健华
字体大小
- | +

蛋白组学质谱分析中,样本前处理的酶切环节,直接决定蛋白鉴定数量、肽段覆盖度与数据重复性。漏切率高、酶批次差异、动物源病毒污染、非特异性切割,是很多小伙伴实验踩坑的重灾区。想要拿到稳定可信的质谱数据,选对质谱级工具酶是第一步。

今天为大家带来两款无动物源性质谱级重组蛋白酶:重组胰蛋白酶(质谱级)、重组赖氨酰内切酶Lys-C(质谱级),适配细胞、动物组织、IP免疫共沉淀样本,解决酶切不稳定、漏切偏高的痛点。

一、重组胰蛋白酶(质谱级)

产品简介

基因工程重组表达的丝氨酸蛋白水解酶,特异性识别并切割赖氨酸 (K)、精氨酸(R)的C-末端肽键,广泛用于蛋白组学蛋白酶解、肽段定位、蛋白序列研究,适配293T细胞、组织、IP样本等多种样本类型。

核心优势

无动物源性:毕赤酵母重组表达,全程无动物源原料,无外源病毒、致病物质污染风险。

高纯度高活性:HPLC纯度≥95%,比活高,宿主菌体蛋白、外源DNA残留严格控制在限度以内。 

低漏切,数据更可靠:多批次样本验证,293T样本漏切率24.30%,大鼠肝脏样本漏切率22.80%,优于市面同类竞品。

批间稳定可控:规模化批量生产,质控严格,规避批次波动带来的实验重复差。

关键参数                                                                                                                                                           

来源

毕赤酵母

外观

白色、类白色冻干粉末

蛋白电泳

单一主条带

分子量

23.5±2.4 kDa

纯度

≥95%

酶比活性

≥3800 USP units / mg pro

蛋白含量

40%-70%

外源DNA残留量

≤100 ng / mg pro

菌体蛋白残留量

≤100 ng / mg pro

最佳pH

7.0-9.0

溶解性

在水或缓冲液中可溶

推荐使用条件

酶:底物蛋白 = 1:50-1:20;1 μg胰酶可酶切2050 μg总蛋白,反应pH 7.0-9.0。

结果展示

Sample

蛋白数

肽段数

漏切率

293T-EV

7814

112498

24.3%

293T-HLS

7853

114950

29.9%

293T-WIN

7852

114803

38%

Ratliver-EV

6314

73584

22.8%

Ratliver-HLS

6564

76857

28.1%

Ratliver-WIN

6093

73558

36%

订购信息                                                         

产品货号

产品名称

规格

EV01-01-01

重组胰蛋白酶(质谱级)

100 μg

EV01-01-02

重组胰蛋白酶(质谱级)

100 μg×10

二、重组赖氨酰内切酶 Lys-C(质谱级)

产品简介

大肠杆菌重组表达的丝氨酸蛋白酶,与天然LysC活力、特异性保持一致;特异性切割赖氨酸残基、S氨乙基半胱氨酸残基羧基端肽键。

小提示:LysC酶切效率优于单胰酶,科研中常Lys-C+胰蛋白酶联用,实现分步消化,大幅提升难酶切蛋白、膜蛋白的肽段覆盖度,弥补单一胰酶酶切不充分的短板。适用于肽图谱分析、蛋白序列分析、蛋白组样本前处理。

核心优势

无动物源性:重组制备,无动物源原料,规避外源污染。

高特异性:无杂蛋白酶污染,几乎无非特异性切割,降低质谱背景干扰。

批间稳定性优异:全套严格质控,保障多批次实验结果可重复。

关键参数                                                                                                                                                                

来源

大肠杆菌

外观

白色、类白色冻干粉末

蛋白电泳

单一主条带

分子量

29.2±2.9 kDa

纯度

≥95%

酶比活性

≥2.5 AU / mg pro

蛋白含量

30%-70%

外源DNA残留量

≤100 ng / mg pro

菌体蛋白残留量

≤100 ng / mg pro

最佳pH

8.5-9.5

溶解性

在缓冲液中溶解性良好

订购信息                                                                

产品货号

产品名称

规格

EV01-02-01

重组赖氨酰内切酶(质谱级)

20 μg×5

EV01-02-02

重组赖氨酰内切酶(质谱级)

20 μg×10

 

高频 FAQ,实验少走弯路

Q1:蛋白组前处理,该选胰酶还是Lys-C? 

A1:胰酶切割K/R位点,是蛋白组最常用酶;Lys-C只切割赖氨酸位点,酶切效率更高。建议策略:Lys-C先酶切,再加入胰蛋白酶联合消化,改善蛋白消化充分度,提升蛋白鉴定数与序列覆盖度。

Q2:哪些物质会抑制酶活性?如何处理? 

A2:体系避免TLCK、PMSF、盐酸胍等抑制剂;体系无机盐浓度>0.1 M会抑制酶活,优先脱盐再酶切;无法脱盐可提高酶用量,适当延长酶切时间。

小结

质谱级蛋白酶是蛋白组学的基础工具,动物源酶存在病毒污染风险,批次波动、漏切率高会直接影响课题数据质量。本系列两款重组酶,无动物源、高特异性、低漏切,既可单独使用,也可组合联用,适配细胞、组织、IP等各类质谱样本前处理,助力得到更稳定、更深度的蛋白组学结果。


查看信源地址

编辑: 李晶辉

版权声明

本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。同时转载内容不代表本站立场。

  • App下载