01 实验介绍
Transwell迁移实验的核心原理是 利用一种带有微孔滤膜的培养小室，在体外模拟细胞穿过细胞外基质或血管内皮屏障的迁移过程。在滤膜的上室（即Transwell小室）将细胞接种在上室内，由于聚碳酸酯膜具有通透性，下层培养基液中的成分可以影响到上室内的细胞，具有迁移能力的细胞会主动朝着下室的方向移动、变形通过滤膜上的微孔，到达滤膜的下表面，从而可以研究下层培养基的成分对细胞生长、运动等的影响。
02 实验方法
（1）取对数生长期的细胞，融合至70%~80%时，加入无血清培养基培养24小时后对细胞进行分组；
（2）向细胞加入PBS洗涤2次后加入0.25%胰酶消化细胞，细胞完全脱落后加入10% FBS的完全培养基重悬细胞终止消化，收集细胞，于1000rpm低速离心5min，弃上清；加入无血清培养基重悬细胞；
（3）对细胞计数后，每孔加入1-2×104个细胞于 Transwell细胞培养板的小室上室，体积为200μl，在下室加入600ul含10% FBS的完全培养基。
（4）将Transwell孔板放入37℃，5%CO2培养箱中培养48h;
（5）取出Transwell小室，用棉签擦去上室的细胞，在另一干净的24孔板的孔中加入适量固定液，小室底部浸入溶液中固定30min；
（6）吸取固定液，PBS洗涤2遍，注意避免碰到小室底部，将小室底面浸入0.1%结晶紫染色液10-20min，PBS洗涤2遍，用棉签轻轻擦拭小室的上侧，除去未与细胞结合的结晶紫,风干后，显微镜（100×）下随机选取3-5个随机视野，观察计数，每组3个复孔；
（7）对数据进行数据统计。
03 结果展示
04 Transwell迁移实验 vs. 侵袭实验
| 特征 | 迁移实验 | 侵袭实验 |
| 滤膜涂层 | 无涂层或仅铺有很少的基质胶（如用于细胞贴壁的胶原） | 铺有一层较厚的基质胶 |
| 检测能力 | 细胞的运动/趋化能力 | 细胞的侵袭能力（运动+降解细胞外基质的能力） |
| 模拟过程 | 细胞在二维表面的定向移动 | 细胞穿过三维的细胞外基质屏障（更接近体内转移） |
| 实验难度与时间 | 相对简单，时间较短 | 更复杂，时间较长（细胞需要时间降解基质胶） |
05 应用和研究意义
肿瘤转移研究：评估不同癌细胞的迁移和侵袭潜能。
炎症研究：研究白细胞（如中性粒细胞、单核细胞）向炎症部位的趋化迁移。
药物筛选：测试潜在药物（如化疗药、抑制剂）是否能抑制癌细胞的迁移和侵袭。
血管生成研究：通过改变条件，可以研究内皮细胞的管腔形成（这时滤膜涂层和检测方法会有所不同）。
信号通路研究：通过加入特定的信号通路激动剂或抑制剂，研究哪些通路调控了细胞的迁移行为。