小麦是我国主要粮食作物之一,所以关于小麦分子生物学方面的研究也非常重要,技术也日益深入,不论是基因克隆与转化,遗传图谱构建,特定基因型检测,分子标记辅助育种及 DNA 指纹数据库构建等,在小麦育种中应用广泛,高质量的 DNA 提取的在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础,而植物基因组 DNA 提取的方法有许多,但是传统方法,使用酚、lv 仿等有害试剂,且步骤多,耗时长。因此推荐使用简单快速、无毒环保的磁珠法植物基因组 DNA 提取的方法。
上海领骏生物有限公司的植物基因组 DNA 提取试剂(磁珠法),主要用于从多种植物不同组织中提取基因组 DNA,裂解液直接裂解植物样本,释放出核酸,磁珠在结合液的作用下选择性的吸附裂解液中的核酸,通过洗涤液的清洗除去磁珠吸附的少量杂质,在洗脱液的作用下磁珠释放吸附的核酸,即获得高质量的基因组 DNA。整个过程操作便捷尤其适合于自动化核酸提取平台。提取的基因组 DNA 得率高、纯度高、质量稳定可靠,可以应用到多种下游分子生物学实验。
我司植物基因组 DNA 提取试剂(磁珠法)产品优势有以下几点:
1、对于新鲜及干燥样本,都能达到很好的提取效果。
2、提取产物纯度好、产量高、电泳条带完整。
3、通用性强,适合从不同种类植物的叶片、果实、种子等样本中提取基因组 DNA。
4、使用过程安全,无需液氮研磨,产品中不含酚、lv 仿等有害试剂。
5、本试剂盒可适用于手工提取也可整合适用于多种高通量提取仪。
6、快速,简捷,整个提取过程可在 20-60 min 内获得高纯度的基因组。
我们以小麦叶片为实验材料采用上海领骏生物有限公司的植物基因组 DNA 提取试剂(磁珠法)提取小麦基因组 DNA,试剂盒内包括裂解结合液、磁珠、PK、DTT、洗涤液,还有洗脱液等试剂。实验结果如下:
序号 | 样本 | 取样量 | A260/A280 | A260/A230 | Conc.(ng/ul) | 产量(μg) |
1 | 小麦叶片 | 20 mg | 1.881 | 2.223 | 372.3 | 37.2 |
2 | 小麦叶片 | 20 mg | 1.879 | 2.216 | 375.35 | 37.5 |
3 | 小麦叶片 | 20 mg | 1.871 | 2.212 | 371 | 37.1 |
4 | 小麦叶片 | 20 mg | 1.878 | 2.21 | 370.95 | 37.1 |
电泳图如下:
M:Marker(2K,1K,750bp,500bp,250bp,100bp);
1-4:小麦叶片(20 mg)
结果分析:
超微量核酸测定仪测试结果表明:
①A260/A280 的值在 1.8 以上,A260/A230 的值在 2.0 以上,提取产物纯度高。
②20 mg 小麦叶片样本的核酸提取产量在 37 µg 以上。
琼脂糖凝胶电泳结果表明:
①小麦叶片,均有明亮条带且完整性好。
综上所述:使用本试剂盒提取小麦叶片样本基因组 DNA,提取产物纯度高、产量高、电泳条带完整。