在核酸提取过程中，若磁珠出现团聚结块，会导致核酸结合效率下降、洗涤不彻底或回收率降低。分析以下原因和解决办法 （核酸提取磁珠，点击了解详情）：
一、磁珠团聚的常见原因
1. 磁珠储存不当：反复冻融、长期置于高温或剧烈震荡。
2. 缓冲液问题：裂解液或洗涤液 pH 异常、盐浓度不当或含有沉淀。
3. 操作不当：混匀不充分、磁珠干燥过度或静置时间过长。
4. 样本问题：高粘度样本（如全血、植物组织）或过量杂质（多糖、蛋白）。
二、解决方案
1. 磁珠预处理
涡旋重悬：使用前剧烈涡旋磁珠悬液 ≥ 30 秒，确保完全分散（肉眼观察无沉淀）。
短暂离心：低速离心（2000 rpm, 5 秒）使管壁液滴聚集，便于重悬。
超声处理（可选）：对顽固结块，用水浴超声仪短暂超声（10 秒，避免产热）。
2. 优化操作步骤
充分混匀：加入磁珠后，立即用移液器吹打 10 次或涡旋 10 秒，在裂解和洗涤步骤中，每步混匀需彻底（避免磁珠吸附在管壁）。
避免磁珠干燥：乙醇洗涤后尽快进入下一步，干燥时间 ≤ 10 分钟（肉眼见磁珠微湿润）。
控制静置时间：磁珠结合核酸时，静置时间按说明书操作（通常 3-5 分钟），过长易结块。
3. 调整缓冲液条件
检查缓冲液 pH 和盐浓度：
裂解液 pH 应为碱性（如 pH 8.0-8.5），若沉淀需更换新批次。
确保洗涤液（如 80% 乙醇）新鲜配制，无水分挥发导致的浓度变化。
添加助悬剂（谨慎使用）：对高粘度样本，可加入 0.1% Tween-20（终浓度）改善分散性（需验证兼容性）。
4. 样本优化
稀释或预处理：
高粘度样本（如全血）用缓冲液稀释后再裂解。
植物/真菌样本先用液氮研磨或 CTAB 法去除多糖多酚。
减少样本量：
结块严重时，降低样本起始量（如血液从 200μL 减至 100μL）。
5. 磁珠保存与质量控制
正确储存：磁珠保存于 2-8℃（避免冷冻），使用前平衡至室温。
验证磁珠活性：取少量磁珠加入清水，正常应均匀分散；若结块则提示磁珠失效。
三、紧急补救措施
若实验中发现磁珠结块：
1. 暂停实验：立即涡旋或吹打尝试重悬。
2. 延长结合时间：结块时延长核酸结合时间至 10 分钟（轻柔摇晃）。
3. 离心后重悬：低速离心（1000 rpm, 1 分钟），吸弃上清，用新鲜洗涤液重悬。
四、预防措施
分装磁珠：避免反复冻融和长时间室温暴露。
定期校准移液器：确保试剂体积准确，避免盐浓度偏差。
选择低吸附耗材：使用硅化离心管减少磁珠粘附。
问题排查表
| 现象 | 可能原因 | 解决方案 |
| 磁珠沉底不分散 | 储存不当/过期 | 涡旋+超声，更换新批次 |
| 结合后结块 | 样本杂质过多 | 稀释样本或增加预处理 |
| 洗涤时结块 | 乙醇浓度不准 | 新鲜配制 80% 乙醇 |
通过以上方法，可有效解决磁珠团聚问题。若持续存在，欢迎点击咨询上海领骏生物。