人炎症因子抗体芯片3(40)抗体列表AbL-47
RayBio® Human Inflammation Antibody Array 3 (40) Antibody List
半定量检测40个指标
Eotaxin / CCL11 | IL-1 beta | IL-10 | IP-10/ CXCL10 | PDGF-BB |
Eotaxin-2/ CCL24 | IL-2 | IL-11 | MCP-1/ CCL2 | RANTES/ CCL5 |
GCSF | IL-3 | IL-12 p40 | MCP-2/ CCL8 | sTNF RI/ TNFRS1A |
GM-CSF | IL-4 | IL-12 p70 | M-CSF | sTNF RII/ TNFRS1B |
I-309/ CCL1 | IL-6 | IL-13 | MIG/ CXCL9 | TGF beta 1 |
ICAM-1 | IL-6 sR | IL-15 | MIP-1 alpha/ CCL3 | TIMP-2 |
IFN gamma | IL-7 | IL-16 | MIP-1 beta/ CCL4 | TNF alpha |
IL-1 alpha | IL-8 | IL-17 | MIP-1 delta/ CCL15 | TNF beta |
一、实验原理
该芯片采用夹心法,其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上,生物样品加入到芯片上一起孵育反应后,其特异性的抗原与捕获抗体结合,然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育,最后通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片,高品质的抗体对是此方法的关键,夹心法有很高的灵敏度,检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白,芯片上就需要增加一个抗体对,这样可能出现交叉反应,因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测,验证是否可以引入这个抗体对,且不对其他抗体对检测造成干扰,通过优化筛选将交叉反应降到最小。
由于抗体对之间可能存在的相互影响,夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制,但是可以用于蛋白的定量检测。目前,RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对,基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种,定量抗体芯片有大于45种,涵盖的因子450多个,包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。
二、芯片载体的区别和选择:
1. 膜载体,就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜,采用ECL化学发光作为显色信号,这种膜载体相对玻片载体使用时,需要等多一些样品用量,但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片,通用性高。
2. 玻片载体,是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体,用Cy3或Cy5,绿色荧光信号作为显色信号,样品用量少,但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。