分子量表征—高分辨分子量检测-质谱测序

2025-05-13 14:35 来源:丁香园 作者:
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分子量测定是蛋白质样品质量控制的重要环节。使用高分辨质谱分析电喷雾得到的多电荷信号,利用 PEAKS ID 对信号进行去卷积分析,可获得精确分子量数值。

技术流程

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服务优势

1.采用Orbitrap Eclipse 质谱仪,可提供超高分辨率、高灵敏度和高质量精度的检测;
2.使用PEAKS ID 软件对信号进行去卷积分析及对蛋白质翻译后修饰自动注释(如糖基化、N端焦谷氨酸环化、C端赖氨酸丢失等),获得高质量的精确分子量。

应用领域

1.测定大分子蛋白质样品(约10-150KD)的完整精确分子量,可以测定抗体类药物完整分子量、还原分子量、完整脱糖分子量、还原脱糖分子量、亚结构片段分子量;
2.可以初步分析蛋白质的修饰状态(比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情况等),并进行相对定量分析

案例分享

如下图所示,将标准品 Intact mAb Mass Check Standard 进行还原切糖和只还原不切糖的处理后,通过 PEAKS ID 软件可以得到蛋白标准品轻重链的精确分子量。

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图 | Intact mAb Mass Check Standard 还原切糖处理后,通过PEAKS ID 软件解析轻重链的精确分子量

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图 | Intact mAb Mass Check Standard 还原处理后,通过PEAKS ID 软件解析的重链精确分子量


编辑: 朱卿

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