背景：
在体内，基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。基质胶是一种可溶性的基底膜制剂，这种基质是从 Engelbreth-Holmwarm(EHS) 小鼠肉瘤，一种富含细胞外基质蛋白的肿瘤中抽提出 来的。它的主要成分是层粘连蛋白，接着是胶原蛋白 I、硫酸乙 酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。基质胶也含有转化生长因子 β、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、 组织纤溶酶原激活物，和在 S 肿瘤中自然出现的其他生长因 子。基质胶对正常和变换的锚定依赖型上皮样细胞和其 他细胞类型的附着和分化是有效的。这些细胞类型包括神经元肝细胞支持细胞小鸡品状体上皮细胞和血管内皮细 胞。在成年大鼠肝细胞血管内皮细胞以及小鼠和人乳腺上皮细胞的三维细胞培养中，基质胶会影响基因 的表达。这是几种类型肿瘤细胞侵袭实验的基础，文持体内末梢神经再生，并提供体外和体内血管再生研究的必 需底物。基质胶也支持免疫抑制小鼠中体内人类肿瘤的 增殖。基质胶能用于未分选乳腺细胞的移植以及分选的上皮细胞亚群嵌入基质胶。这一基质也被作为癌症于细胞模型并被证明能在体内增强肿瘤生长速率。
来源：
Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肿瘤
基质胶的融化与保存
【注】：KEL Biotech Matrix 基质胶对温度非常敏感，千万不可多次重复冻融。KEL Biotech Matrix 基质胶的分装以及凝胶前的准备过程中都必须在冰上（4℃）操作，因为温度稍微提高，都很可能出现成胶现象，从而导致基质胶不均匀或者影响后续的凝胶。用来盛放的试管或者分装的枪头都必须进行预冷。
a）收到产品后，如果暂时不使用，请整瓶直接放到 -20℃ 冻存（不要放在无霜冰箱内）。
b）第一次使用，将整瓶 KEL Biotech Matrix 基质胶放入冰盒内再放到 4℃ 过夜，使其充分融解。
使用特别注意：
KEL Biotech Matrix 基质胶在 22-35℃ 能够快速成胶。为了保证 KEL Biotech Matrix 基质胶的成胶性能与稳定性，最终稀释浓度不应低于 3 mg/mL（ KEL Biotech Matrix 基质胶原液的浓度因批次不同有差异）。可用无血清培养基来稀释 KEL Biotech Matrix 基质胶，稀释后需要立即使用。
A. 薄胶制备方法
1）融化后，用预冷的枪头混匀 KEL Biotech Matrix 基质胶。
2）将需要使用的培养板置于冰上，按 50 μL/cm2 生长面积的浓度加入 KEL Biotech Matrix 基质胶。
3）在 37℃ 放置 30 min，此时平板即可使用。
B. 厚胶制备方法
1）融化后，用预冷的枪头混匀 KEL Biotech Matrix 基质胶。
2）将需要使用的培养板置于冰上，将培养的细胞与 KEL Biotech Matrix 基质胶混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照 150-200μL/cm2 生长面积的浓度加入 KEL Biotech Matrix 基质胶。
3）在 37℃ 放置 30 min，此时即可加入细胞培养液。细胞也可生长在此厚胶的上层。
C．薄层包被方法
1）融化后，用预冷的枪头混匀 KEL Biotech Matrix 基质胶。
2）采用无血清培养基稀释 KEL Biotech Matrix 基质胶到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验，从而确定最佳的包被浓度。
3）将稀释的 KEL Biotech Matrix 基质胶加入需要包被的培养器皿中，包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育 1 小时。
4）去除未凝固结合的 KEL Biotech Matrix 基质胶，用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。
【注】：KEL Biotech Matrix 基质胶包被的平板最好当天使用，但也可根据具体应用调整。包被好的平板加入培养基后，在 37℃ 最久可存放 1 周。
重构和使用：
在基质胶小瓶冻融的过程中可能会发生颜色的变化，由于二氧化碳和碳酸氢盐缓冲液以及酚红的作用，颜色会从淡黄色变化到深红色。颜色的变化是正常的，不会影响产品的功效，颜色 将会在 5%CO2 平衡下消失。请将小瓶淹没在冰中并放置在 4°C 冰箱里过夜解冻。一旦基质胶被解冻，请涡旋小瓶以确保材料的均匀分散。请将基质胶全程保持在冰上。请 使用无菌技术处理。请将解冻的基质胶放置在无菌的区域，在小瓶的顶部喷洒 70% 的乙醇并风干。使用预冷的移液管轻柔的吸取基质胶以确保其均匀性。分装基质胶到离心管中，每当基质胶堵塞吸头 和/或移液管测量不精确时请更换吸头。如果将材料放置在 4°C 的冰上 24-48 个小时，凝胶化的基质胶可能会被重新水化。基质胶可以被用来作薄层凝胶 (0.5 mm)，细胞可以接种在其顶部。当作为 1 mm 凝胶层使用时，细胞也可以在基质胶的内部培养。大量的稀释将会导致一个薄的、非凝胶化的蛋白层。这对于细胞附着是有用的，但是在分化研究中可能不起作用。
产品特性：
KEL Biotech Matrix 基质胶会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与 CO2 作用引起的，但是与 5% CO2 平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使 CTrueBlue 基质胶分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用 70% 乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证 KEL Biotech Matrix 基质胶呈匀浆状。细胞可在 0.5 mm 厚度的 KEL Biotech Matrix 基质层表面生长，也可在 1 mm 厚度的 KEL Biotech Matrix 基质胶三维基质内生长。过度稀释的 KEL Biotech Matrix 基质胶会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。
【注】：可将融化后的 KEL Biotech Matrix 基质胶分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。KEL Biotech Matrix 基质胶在 22-35℃ 温度环境下快速成胶，因此融化时在 4℃ 冰上过夜解冻（4℃ 时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作 KEL Biotech Matrix 基质胶。成胶后的 KEL Biotech Matrix 基质胶可以在 4℃ 24－48 小时后重新呈液态。
