产品概述
血液样本是临床研究的重要生物信息来源,但存在蛋白种类复杂、动态范围大及高丰度蛋白占比高等问题,为蛋白组检测带来挑战。本试剂盒基于免疫磁珠捕获法,特异性富集血液样本中的循环蛋白,有效降低高丰度蛋白对低丰度蛋白信号的覆盖,提升低丰度蛋白的信号强度、鉴定数量及定量重复性,适用于下游蛋白组学研究。
产品组成及储存条件
名称 | 规格 | 储存条件 |
---|---|---|
Magnetic beads | 25 T | 4 ℃ |
Incubation Buffer I | 30 mL | 室温(RT) |
Incubation Buffer II | 30 mL | 室温(RT) |
Washing Buffer | 30 mL | 室温(RT) |
Elution Buffer | 10 mL | 室温(RT) |
有效期:1 年
产品优势
更深:血浆蛋白的检测深度提升至6000+
更稳:搭配自动化前处理仪器,减少人工操作误差,一次性可处理96个样本
更值:合作广泛,实现性能提升与成本效益的双重优化
技术流程
图1 实验流程图
技术原理
逸微健华特别推出的TioMagn™血浆低丰度蛋白富集试剂盒(EV01-12-01),采用纳米技术有效富集低丰度蛋白,结合Orbitrap™ Astral™高分辨质谱仪,增强蛋白质鉴定的深度和分析通量,克服了血浆样本低丰度蛋白鉴定深度低的难题,为深入理解血浆蛋白开辟了新途径。
结果展示
图2 蛋白数量鉴定结果
使用TioMagnTM(EV01-12-01)试剂盒对血浆样本中的低丰度蛋白进行富集,与富集前的样本相比,蛋白数从954个提升到了6077个。
图3 QC相关性
QC定量相关性验证,结果大于0.95。
图4 QC重复性
图5 QC定量波动分布图
图4、5结果显示:QC重复性验证,CV值为11%,且20%以内定量波动的数据比例非常高,体现数据的高重复性。
操作流程
样本处理:血浆/血清样本离心(3000 g,10 min),取上清备用(需长期保存时置于-80 ℃,避免反复冻融)。
稀释样本:取200 μL上清,加入800 μL Incubation Buffer I,吹吸混匀。
磁珠孵育:加入40 μL Magnetic beads,室温震荡孵育1 h。
初次洗涤:磁吸3 min,弃上清。
二次洗涤:加入1 mL Incubation Buffer II,颠倒混匀20次,磁吸3 min弃上清。
三次洗涤:加入1 mL Washing Buffer,颠倒混匀20次,磁吸3 min弃上清。
洗脱蛋白:
加入100 μL Elution Buffer,涡旋震荡10 min,磁吸3 min后收集上清。
重复步骤7,合并两次洗脱液上清,得到富集蛋白。
下游蛋白组学研究(推荐)
向步骤6的磁珠中加入50 μL蛋白裂解液(EV01-13-01)。
按实验室常规蛋白组学步骤处理,或使用组学前处理试剂盒(EV01-03-01)。
注意事项
使用前充分震荡磁珠,确保均匀悬浮。
避免冷冻、干燥或高速离心磁珠,以免破坏结构。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断、治疗、食品或药品。
关于逸微健华
逸微健华(EVLiXiR)是一家质谱技术驱动下,开发外泌体精确诊疗产品的创新型生物科技公司。发展至今,公司成功开发: ①血液循环蛋白(游离蛋白&外泌体蛋白)标志物发现和诊断技术平台。②规模化生产、纯化和质控的功能性外泌体原料生产平台。③基于蛋白支架的靶向递送活性分子的外泌体递送平台。
此外,可提供三大系列产品加速外泌体研究,包括外泌体科研产品、功能性外泌体原料以及蛋白组学产品,现有货架产品达50多个,涵盖外泌体检测、保存以及递送等全方面。荣誉|成果:公司是国家科技中小型企业,江苏省民营科技企业,省科创大赛优秀企业,东南大学研究生实践基地。申请国家发明专利7项,PCT专利1项,获批实用新型专利4项。公司主导和参与的多项研究成果发表在Molecular Therapy、Journal of Controlled Release、Advanced HealthcareMaterials、Biomaterials Science、Cells、Molecules、Current Oncology等知名期刊上。