产品简介
本试剂盒在磁珠捕获法的基础上进行改良优化，添加了 CD9/CD81/CD63 三种磁珠可特异性捕获 EVs 表面的标志性蛋白。以 CD9 磁珠为例，EVlent™中的功能化磁珠可以高效地将 EVs 捕获到装配了 EVs 特征蛋白 CD9 的抗体的修饰珠上，这些磁珠对 EVs 表面的 CD9 蛋白具有独特亲和性；可满足多种下游实验需求，如电镜、蛋白组学研究、NGS 高通量测序和 WB 检测等。
产品组分及储存条件
| 名称 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| EVlent™磁珠 | 1 mL | 4 ℃ |
| Incubation Buffer I | 50 mL | 室温（RT） |
| Incubation Buffer II | 50 mL | 室温（RT） |
| Washing Buffer | 50 mL | 室温（RT） |
| Elution Buffer | 20 mL | 室温（RT） |
有效期：1 年
产品特点
操作简便：无需超离，仅耗时 2 h。
高效稳定：亲和纯化，损失少；可适用于微量样本的外泌体提取。
兼容性广：专用于血浆血清样本，也适用于尿液、细胞上清、唾液、脑脊髓液等微量样本。
产品数据
图 1.EVlent™磁珠修饰原理及应用于蛋白组学结果
图 2. WB 检测结果，使用本试剂盒提取不同来源的外泌体，均可检测到 CD9
操作流程
样本预处理
血浆样本：
使用 EDTA 抗凝管收集血液，4℃ 离心（3000 g，15 min），收集上清。
-80℃ 保存上清（避免反复冻融）或直接进行外泌体分离。
血清样本：
血液室温静置 1 h，待凝固分层后，室温离心（3000 rpm，10 min），收集上清。
4℃ 再次离心（12000 rpm，10 min），收集上清，-80℃ 保存或直接进行外泌体分离。
EVs 分离步骤
样本离心：血浆/血清样本离心（3000 g，10 min），取上清（避开油脂层）。
稀释样本：取 200 μL 上清，加入 800 μL 预冷的 Incubation Buffer I，室温混匀。
磁珠孵育：加入 40 μL EVlent™磁珠，室温摇匀孵育 1 h。
初次洗涤：磁吸 3 min，弃上清，加入 1 mL Incubation Buffer II，颠倒混匀 20 次，磁吸弃上清。
二次洗涤：加入 1 mL Washing Buffer，颠倒混匀 20 次，磁吸 3 min 弃上清。
洗脱外泌体：
加入 100 μL Elution Buffer，涡旋震荡 10 min，磁吸 3 min 后收集上清。
重复步骤 6，合并两次上清。
下游实验处理
蛋白组学研究（推荐）：
向步骤 5 的磁珠中加入 50 μL 外泌体裂解液（EV02-08-01）。
按常规蛋白组学步骤处理，或使用组学前处理试剂盒（EV01-03-01）。
WB 表征研究：
向步骤 5 的磁珠中加入上样缓冲液。
95℃ 加热 5 min，磁吸后取上清进行 PAGE 胶上样。
备注：
若下游为 NTA/TEM 检测，建议使用 500 μL 血浆/血清样本以提高效果。
注意事项及免责声明
使用前充分震荡磁珠，确保均匀悬浮。
Elution Buffer 有刺激性气味，需在通风橱内操作。
避免冷冻、干燥或高速离心磁珠，以免破坏结构。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断、治疗、食品或药品。
关于逸微健华
逸微健华（EVLiXiR）是一家质谱技术驱动下，开发外泌体精确诊疗产品的创新型生物科技公司。发展至今，公司成功开发： ①血液循环蛋白（游离蛋白 & 外泌体蛋白）标志物发现和诊断技术平台。②规模化生产、纯化和质控的功能性外泌体原料生产平台。③基于蛋白支架的靶向递送活性分子的外泌体递送平台。
此外，可提供三大系列产品加速外泌体研究，包括外泌体科研产品、功能性外泌体原料以及蛋白组学产品，现有货架产品达 50 多个，涵盖外泌体检测、保存以及递送等全方面。荣誉|成果：公司是国家科技中小型企业，江苏省民营科技企业，省科创大赛优秀企业，东南大学研究生实践基地。申请国家发明专利 7 项，PCT 专利 1 项，获批实用新型专利 4 项。公司主导和参与的多项研究成果发表在 Molecular Therapy、Journal of Controlled Release、Advanced HealthcareMaterials、Biomaterials Science、Cells、Molecules、Current Oncology 等知名期刊上。