磁珠法质粒提取试剂盒(去内毒素型)产品特点、优点及应用
产品特点
- 高纯度质粒提取:利用碱裂解法使质粒充分释放,再与磁珠特异性结合,通过外界磁场快速高效分离,经洗涤去除杂质,获得高质量的质粒样品。
- 高浓度质粒产量:2-5毫升过夜培养的菌液可以得到800ug-1500ug的质粒。
- 去内毒素型:特别适用于需要去除内毒素的应用,如细胞转染等。
- 操作简便:整个提取过程无需复杂的仪器设备,手工操作即可完成。
- 适用范围广:适用于多种细菌样本的质粒提取。
优点
- 快速高效:整个提取过程可在短时间内完成,大大提高了实验效率。
- 高纯度:通过磁珠法提取的质粒纯度高,适合后续的分子生物学实验。
- 去除内毒素:特别设计的去内毒素型试剂盒,有效去除内毒素,提高质粒的纯度和质量。
- 稳定可靠:试剂盒中的试剂经过严格的质量控制,确保实验结果的稳定性和可靠性。
- 易于保存和运输:试剂盒中的试剂在常温或2-8℃下保存,运输条件为冷藏,方便保存和运输。
应用
- 分子生物学研究:提取的高纯度质粒可用于多种分子生物学实验,如质粒转化、基因克隆、基因表达分析等。
- 细胞转染:特别适用于需要去除内毒素的细胞转染实验,提高转染效率和细胞存活率。
- 基因治疗研究:高纯度质粒是基因治疗研究中的重要工具,可用于构建重组病毒载体等。
- 药物研发:在药物研发中,高纯度质粒可用于构建重组蛋白表达系统,生产重组蛋白药物。
- 临床诊断:虽然本产品仅限于科研用途,但高纯度质粒在临床诊断试剂的研发和生产中也有重要应用。
产品组成
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|
溶液Ⅰ | 7mL | 2-8℃ |
溶液Ⅱ | 7mL | 常温 |
溶液Ⅲ | 12mL | 常温 |
结合液 | 19mL | 常温 |
磁珠悬浮液 | 1mL | 2-8℃ |
洗涤液 | 9.5mL(第一次使用前加入28ml无水乙醇,混匀) | 常温 |
洗脱液 | 3mL | 常温 |
RNase A | 50ul | 2-8℃ |
操作方法
- 样本准备:取1-10ml过夜培养菌液,加入2.0毫升离心管中,12000RPM离心1分钟,收集细菌沉淀,弃上清。
- 重悬细菌:每管加入250µl溶液I,确保沉淀完全散开,无可见细菌团块。
- 细菌裂解:每管加入250µl溶液II,轻轻颠倒离心管6-8次,使细菌完全裂解,溶液透明。
- 中和:每管加入450µl溶液III,随即颠倒离心管6-8次混匀,可见白色絮状物产生,最高速(13,000rpm左右)室温离心3-10分钟。
- 上清转移:将离心后的上清小心吸入新的离心管内,加入40µl磁珠悬液,加入700微升的结合液,涡旋充分混匀后,室温放置2-5分钟。
- 磁珠分离:将离心管置于磁力架中,待磁珠完全聚集后,小心吸除上清液。
- 洗涤:加入750µl洗涤液,涡旋震荡混匀使磁珠分散开,颠倒2次后将离心管置于磁力架中,待磁珠完全聚集后,尽量吸净残液。
- 干燥:将离心管置于37℃鼓风烘箱5分钟,或室温放置5-10分钟,确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。
- 洗脱:加入50-100μl洗脱液,轻柔震荡使磁珠悬于溶液中,室温孵育3-5分钟,其间甩动离心管1-2次。将离心管置于磁力架中,待磁珠完全聚集后,小心吸取溶液至新离心管中,置于-20℃保存。
注意事项
- 所有操作须严格按说明书进行。
- 实验操作过程中用过的所有枪头,均需打入盛有84消毒液的废液罐中。
- 检测不同的样本时,应在各管上做好标记,避免样本混淆。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
产品链接:https://www.biomart.cn/infosupply/113251349.htm