近日，领星与中山大学第一附属医院张弩教授合作撰写学术论文「Circular RNA-encoded oncogenic E-cadherin variant promotes glioblastoma tumorigenicity through activation of EGFR–STAT3 signalling」，发表于「Nature Cell Biology」，IF：20.042。
研究背景（Background）
胶质母细胞瘤（GBM）是一种常见的、恶性脑部神经肿瘤，其中约 50% 的患者携带驱动基因 EGFR 突变。
CirRNAs 通常代指闭合环状 RNAs，已有研究表明部分 circRNA 能够翻译成蛋白，参与调控神经发育等过程。然而，有关 circRNA 调控 GBM 发生的研究较为缺乏。
本研究中，作者鉴定出胶质母细胞瘤中高表达的环状 RNA（circ-E-Cadherin），其编码的蛋白能够特异性激活 EGFR-STAT3 促进 GBM 的发生。
研究结果（Results）
1，Circ-E-Cad 能够翻译成蛋白，且在 GBM 中高表达
作者分别通过 10 组配对的肿瘤组织及癌旁对照组织的转录组测序、核糖体印记测序分析，鉴定出 Circ-E-Cad 在肿瘤组织及 PDO（Patient Derived Organoid）中高表达。同时，circ-E-Cad 高表达肿瘤患者生存期更短。
进一步通过分析，作者发现 Circ-E-Cad 能够翻译成由 254 氨基酸组成的蛋白质，其末端由 14 个特异的氨基酸组成。
▲ Circ-E-Cad 在 GBM 中高表达且与预后相关
2，Circ-E-Cad 参与调控肿瘤的发生
作者分别在 GSCH2S 中构建 circ-E-Cad 过表达细胞系，在 GSC387 和 GSC4121 中构建 circ-E-Cad 敲减细胞系。通过细胞学实验证实 circ-E-Cad 与肿瘤细胞的干性相关，提示其参与调控了肿瘤的发生。
▲ Circ-E-Cad 参与调控肿瘤的发生
3，Circ-E-Cad 作为分泌蛋白，其 C 端与 EGFR 的 CR2 结构域结合
为了探究 circ-E-Cad 具体的调控机制，作者完成了 circ-E-Cad 末端蛋白的体外纯化，通过截断体等实验发现其 C 端能够特异性的结合 EGFR 的 CR2 结构域。
▲ Circ-E-Cad 与 EGFR 相互作用
4，Circ-E-Cad 是一种不依赖表皮生长因子的激活通路
已知 EGFR 能够受到表皮生长因子 EGF 的刺激，作者分别使用 EGF 和 circ-E-Cad 与细胞孵育，发现 EGF 并不能激活下游 STAT3 等蛋白磷酸化，而 circ-E-Cad 则能够激活 STAT3 的磷酸化，这说明 circ-E-Cad 是一种不依赖于 EGF 的信号途径。
▲ Circ-E-Cad 不依赖于表皮生长因子激活
5，靶向 Circ-E-Cad 能够增强抗 EGFR 抗肿瘤活性
最后，作者分别探究了 EGFR 抑制剂、circ-E-Cad 抑制剂的抗肿瘤活性。体内实验结果证实，单独使用 circ-E-Cad 抑制剂组的抗肿瘤效果明显优于单独使用 EGFR 抑制剂组。同时，当两种抑制剂同时使用时，具有最好的抗肿瘤活性。
▲ Circ-E-Cad 抑制剂具有明显的抗肿瘤活性
研究结论（Conclusions）
本研究中，作者阐述了环状 RNA 编码的蛋白（circ-E-Cad）通过激活 EGFR-STAT3 信号通路调控胶质母细胞瘤的发生。此外，circ-E-Cad 抑制剂与 EGFR 靶向药物联合治疗有望成为脑胶质瘤治疗方案。
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图片来源：领星