【流式应用知多少】临床流式应用特辑之感染性疾病

2020-06-13 17:51 来源:丁香园 作者:
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临床流式的发展日新月异,有意义的指标也越来越多,接下来的几期跟随小贝一起看下流式在各大疾病中的应用吧。本期分享的题目是临床流式应用之感染性疾病。

本期内容:

感染性疾病是临床的常见病、多发病,主要有细菌、病毒、真菌、寄生虫等病原生物入侵体内引起炎性反应,迄今仍然是人类病死和致残的主要原因之一,威胁着人类的身体健康。

感染发生与否及感染的结局,主要取决于宿主的免疫力与病原生物的致病能力。抗感染免疫过程启动时,固有免疫应答与适应性免疫应答既发挥各自独特作用,又彼此密切配合,相互调节,共同完成免疫防御功能。

对胞外菌感染一般以抗体介导的体液免疫为主,并有补体和吞噬细胞参与,而胞内菌感染则以 T 细胞介导的细胞免疫为主,当被感染细胞裂解致胞内菌释放后,体液免疫可起辅助杀伤的作用。

在诸多抗病毒感染的固有免疫因素中,单核-吞噬细胞、NK 细胞及干扰素作用突出。固有免疫又参与适应性免疫应答的诱导。一般体液免疫主要对细胞外病毒起作用,细胞免疫则主要对细胞内病毒起作用。

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随着科学技术的不断进步,感染性疾病的诊断向着早期、快速、自动化、多重检测等方面发展。FCM 是一种对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的手段,具有速度快、精度高、准确性好等优点,已经成为了当代最先进的细胞定量分析技术,可以直接评估免疫细胞功能状态。

淋巴细胞免疫表型检测指标:

T 淋巴细胞,

辅助性及杀伤性 T 淋巴细胞(CD3+,CD3+CD4+/CD8+)

反映机体细胞免疫功能状态

B 淋巴细胞(CD3+CD19+)

反映机体体液免疫功能状态

自然杀伤细胞(CD3-CD16/56+)

反映机体固有免疫功能状态

T 淋巴细胞纯真和记忆亚群(CD4+CD45RA+/CD45RO+)

反映 T 细胞分化阶段的指标

T 淋巴细胞的激活亚群(CD4+/CD8+CD38+/HLA-DR+)

评价细胞的激活状态。

T 淋巴细胞的功能亚群(CD4+/CD8+CD28+)

衡量 T 淋巴细胞功能的重要指标。

调节 T 细胞亚群   (CD4+CD25+CD127-)

反映机体抑制性功能状态


结果解读:

1. 细菌性感染初中期,CD4↑,CD8 正常或↓,CD4/CD8 比值↑,NK 细胞↑。

2. 病毒/胞内菌/寄生虫感染,CD4 正常或↓,CD8↑,CD4/CD8 比值↓。

3. B 细胞(CD3+CD19+)↓:免疫功能低下、临床可见反复呼吸道或消化道;严重病毒性感染;B 细胞(CD3+CD19+)↑:体液免疫增加,体内高亲和力抗体产生也增加,见于各种细菌性感染。

4. 活化 T 细胞(CD8+HLA-DR+, CD8+CD38+)↑,提示机体处于免疫状态,增高程度与病毒的载量呈显著正相关,目前已公认在 EBV 及 CMV 感染患者中 CD8+T 细胞的比例增高,尤其是 CD8+CD38+激活亚群明显增高。其他 CD8+T 细胞比例增高的疾病还可见于麻疹病毒 (measles virus,MV) 感染后的出疹期 、肾综合征出血热患者等。

5. CD4+/CD45RA+升高提示体内 T4 细胞生成增加,如在感染初期或肿瘤初期上调,为免疫系统积极响应抗原刺激。减少提示初始 T4 细胞生成与释放的减少,骨髓造血功能异常,机体免疫能力降低,如在慢性感染或肿瘤进展期也会减少。

6. CD4+CD45RO+升高提示机体免疫应答增强,在感染初期或肿瘤初期均可见此群细胞上调。减少提示机体免疫应答减弱,效应记忆性 T 细胞消耗增多,在慢性感染性疾病肿瘤进展中都会下调,或疾病恢复期也可见 CD4+CD45RO+下调。

7. 抑制性 T 细胞↑,调节性 T 细胞 (Treg)↑,提示机体处于免疫耐受。

8. HIV 感染和艾滋病(AIDS)病情监测:HIV 病毒的攻击对象为 CD4 细胞, CD4+T 及其纯真亚群(CD4+CD45RA+)数量显著较少; CD28 表达比例显著减少。CD4+T 细胞比例与数量随着病毒的增加进行性下降,标志着免疫系统受到严重损害,当 CD3+CD4+<200/ul 时,纯真亚群(CD4+CD45RA+)及 CD28 表达下降较感染中早期更严重,可发生多种机会感染和肿瘤。

9. 慢性乙肝患者和 HBV 携带者 CD4+T 细胞、CD8+T 细胞、CD4+CD28+T 细胞、CD8+CD28+T 细胞计数均减少,提示机体参加免疫反应的免疫活性细胞不足, 导致机体清除病毒的能力降低;慢性乙肝患者 CD8+CD38 +T 细胞比例升高,提示患者体内存在 T 淋巴细胞的明显激活,这可能正是其肝细胞损伤的原因之一;慢性乙肝患者 CD4+CD45RA-记忆 T 细胞比例显著升高,CD4+CD45RA+纯真 T 细胞比例及计数均显著减少;慢性乙肝患者外周血调节性 T 细胞 (Treg) 比例升高,可能是对肝脏组织炎症坏死作出的反应,用以保护宿主。  

10. 手足口病 T 细胞(CD4,CD8)数量显著减少,B 细胞(CD3+CD19+)数量和比例显著增加,危重症患儿 B 细胞增加更明显,检测 B 细胞能预测病情的严重程度。

11. 甲型 H1N1 流感患者与正常人相比 T、CD4+T、CD8+T 细胞计数均下降。

12. 肺结核患者外周血 CD4+T 细胞中以初始细胞(CD45RA+CCR7+)为主,BCG 刺激后, 产生的抗原特异性 CD4+T 细胞中则以中央记忆细胞(CD45RA-CCR7+)为主,可能在防止或者降低再感染的严重程度方面起重要作用。

13. 脓毒症患者外周血 T、CD4+T 及 CD8+T 淋巴细胞计数均显著减少,且淋巴细胞减少的程度与疾病的严重性和预后不良相关。

※  本文中提及产品仅用于科研,不用于临床诊断。

编辑: 翟超男

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