上一期小贝介绍了流式在感染中的应用，今天我们继续介绍感染性疾病的新指标—中性粒细胞 CD64。
本期内容：
CD64 是能识别免疫球蛋白、对 IgG 单体具有高亲和力、介导体液免疫和细胞免疫、对感染性疾病具有早期诊断价值的 IgG Fc 片段受体 1(FcγRⅠ)。正常情况下, CD64 主要表达于巨噬细胞、单核细胞及树突状细胞表面, 中性粒细胞表面几乎不表达 CD64。当机体患感染性疾病时, 中性粒细胞表面 CD64(以下简称 CD64) 表达迅速升高。CD64 作为感染性疾病良好的检测指标, 在临床上具有广泛的应用前景。
i. CD64 的功能
CD64 能识别免疫球蛋白的 Fc 段, 表达受细胞因子的调控, 起连接体液免疫和细胞免疫的桥梁作用。CD64 可通过抗体依赖性细胞毒作用、细胞吞噬作用和免疫复合物清除作用实现对病原微生物的清除。当机体感染或内毒素入侵时大量致炎细胞因子 (γ 干扰素和中性粒细胞集落刺激因子) 释放, 中性粒细胞激活, CD64 大量表达。一般情况下, 机体感染或内毒素入侵时 CD64 在刺激后 4～6 h 即可升高。CD64 的表达无性别差异。新生儿表达高于成人, 怀孕妇女高于未怀孕者, 老年人高于成年人。使用重组 γ 干扰素和中性粒细胞集落刺激因子治疗时, 可引起 CD64 升高。
ii. CD64 在感染性疾病中的诊断价值
与白细胞计数、C 反应蛋白 (CRP) 和降钙素原 (PCT) 比较,CD64 在诊断感染性疾病中具有更高的敏感性和特异性。白细胞计数除了在全身炎症性反应及败血症时升高外, 在运动、妊娠等某些生理情况和创伤、 急性出血时也会升高, 在伤寒和副伤寒感染时下降; CRP 不仅在细菌感染时升高, 而且在急性心肌梗死、创伤、外科手术、肿瘤浸润时也升高, 诊断特异性不高。PCT 作为诊断感染和败血症的指标准确性好于 CRP, 而且感染时比 CRP 升高更迅速。但近期分析表明 PCT 在诊断细菌性感染时敏感性仅为 76%, 特异性仅为 70%, 只有中等诊断能力。CD64 在机体感染时 4-6 h 即可升高,22 小时达到高峰，诊断感染性疾病时敏感性和特异性都比较高 (90%～100%), 显示了很好的诊断优势。
iii. CD64 的流式检测和结果判读
CD64 的检测方法比较简便。基本过程是: 抗凝的外周血 50 μL 与荧光素标记的 CD64、CD45、CD14 等抗体混匀, 室温避光孵育 15 min 后加入溶血素, 待标本完全溶血后用 PBS 洗涤, 即可上流式细胞仪检测。CD64 较稳定, 检测标本在室温下可保存 36 小时,4 ℃ 可以保存 72 小时，适合作为实验室检测指标。
传统的结果判读方法包括用中性粒细胞 CD64 阳性细胞百分率或者用 CD64 的平均荧光强度/荧光中位值来表示，大连医科大学附属第二医院在该项目的开展中积累了丰富的经验，并采用中性粒细胞 CD64 指数的概念来进行结果判读，取得了很好的临床指导效果，其具体计算公式为：
由于荧光抗体、溶血素、仪器等不同都会造成荧光强度差异，因此不同实验室建立此方案时建议重新验证参考范围，以达到最精确的判读结果。
参考文献：诊断感染性疾病的新指标: 中性粒细胞 CD64 检验医学 2012 年 1 月第 27 卷第 1 期
CD64 已获证产品：
CD64 检测试剂（流式细胞仪法) | CD64-FITC | 国械备 20190733 号 |
CD64 检测试剂（流式细胞仪法) | CD64-PC5 | 国械备 20190734 号 |
CD64 检测试剂（流式细胞仪法) | CD64-APC-Alexa Fluor 750 | 国械备 20190735 号 |
