很荣幸能够有机会参与伯乐成像系统 20 周年的活动,博士生涯也过去了一半有余,我来分享一下伯乐免染胶给我带来的帮助。
由于研究的课题是泛素化方向,所以不可避免要经常检测泛素化变化。先上一张常见的泛素化 western blot 的图给大家看看。
Actin 是我们常用的内参,上图是一张泛素化程度变化显著的结果,而大部分情况下我们没有这么幸运,实验组和对照组泛素化变化没这么明显,那究竟有没有变化?用 actin 做归一化重复性不太好,尤其是泛素化程度变化不明显的时候,那课题还能不能往下做?我的头两年博士生涯基本就是在是否继续往下做的摇摆中挣扎。
机缘巧合,实验室新采购的 ChemiDoc 装机培训时,伯乐公司介绍了他们的专利 Stain-Free 免染技术以及如何利用这个技术做总蛋白定量。一刹那我有了启发,这不正是解决我的问题的嘛。从那之后,我的内参是这样的画风。
直接用 ChemiDoc 自带的软件进行归一化,泛素化变化趋势的重复性得到了极大的提高。还省得我再去检测 actin。
在我的带领下,实验室师弟师妹们做泛素化 western blot 的信心也提高了不少。
祖国 70 周年盛典,越来越昌盛;伯乐成像 20 年庆,新科技越来越多;也祝愿自己能够尽快发表文章,早日毕业!