「命名」嘿!我不叫小明!
小编经常被问到:我要写文章了,我用的这个敲除小鼠名字叫什么啊?到底应该怎么表示啊?
那今天的内容就会让你明明白白,还能举一反三哦!
基因工程小鼠的命名规则
有没有发现,当你在查询或看 paper 时,往往会蹦出几个贼长的,还夹杂着数字、上标、符号的名称,比如:129-Trp53tm1 Holl/J、FVB-Tg(PomcCre)5Brn...... 看上去很复杂的样子。这些其实是基因工程小鼠的全名。
如果把这一长串字符解构一下,常见的基因工程小鼠可以分为两种命名方式:
• 基因定点修饰的小鼠命名
比如:敲除、敲入、点突变等等。
• 随机转基因的小鼠命名
1. 基因定点修饰小鼠的命名
这一类小鼠的名称基本长这样:
下面我们对这些组成部分逐一说明~
品系背景
如果是在单一的小鼠背景上完成的基因修饰,并且在繁育过程中未引入其它品系,那么就可以以品系简写来表示。比如:
如果是在混合品系背景上,那么可以用这几个品系(<3 个)缩写,并以分号作为间隔。分号前表示受体,分号后表示供体。比如:在一个来自 C57BL/6 与 129 杂交 ES 细胞系上定点敲除某个基因,就可以用 B6;129 表示。直至这个品系与 C57BL/6 小鼠回交至近交系程度,那么可以改写为 B6.129。
如果供体品系是混合背景或有未知来源,那么回交至受体品系的近交系程度后,可以用.Cg 来表示,比如:B6.Cg。
如果存在 3 个以上祖系或有未知来源的混合遗传背景,那么以 STOCK 来表示。
被修饰的基因
这里的基因名用的是 Gene Symbol。
Gene Symbol 和 Gene Name 到底有什么区别呢?
Gene Symbol 有以下特点:
• 物种中唯一的
• 短,3-5 个字母,最多不超过 10 个字母
• 只用罗马字母和阿拉伯数字
• 大写字母开头,后跟小写字母或数字
• 不包括组织特异性或分子量
• 最好跟 Gene Name 的首字母一致
• 斜体表示
• 不同物种的同源基因使用相同的 Gene Symbol
Gene Name 则一般有以下特点:
• 简短,可以是几个单词,包含基因功能或特点
• 首字母小写(人名或专有名词除外)
• 使用美式拼写方法
举个例子你就明白啦,例如:
Shh 是 Gene Symbol,而 sonic hedgehog 则是它的 Gene Name。
所以,如果你想查找某个基因的敲除品系,那么最好输入 Gene Symbol,而不是 Gene Name 或者曾用名。
这里特别提一下定点过表达的这类情况:
目前最常用的两个定点过表达的整合位点,一个 Rosa26 位点,一个是 H11 位点。
• Rosa26 是一个基因,所以可以用它的 Gene Symbol,也就是 Gt(ROSA)26Sor。
• H11 并不是某一个特定基因,而是存在于两个基因之间的一个特定染色体位置,所以没有 Gene Symbol。目前公认的命名是 Igs2,表示 intergenic site 2 的缩写。
修饰方式(上标)
• tm
对于 ES 细胞打靶途径获得品系,用 tm 表示 targeted mutation。
• em
对于 CRISPR/Cas9 或 Talen 等核酸酶系统介导的基因修饰品系,用 em 表示 endonuclease-mediated mutation。
编号(上标)
这里的编号是指在该实验室中,对该基因修饰的序列号。
例如:Trp53tm1 Holl 表示在 Holl 实验室对 Trp53 基因进行的第一次突变。
有时候会看到 tm1.1、tm1.2 的情况,这是指条件性基因敲除(CKO)小鼠在与生殖系重组酶工具鼠交配后获得的子代小鼠品系,为了与亲代 CKO 小鼠(编号为 tm1)区分。而亲代 CKO 小鼠与其它组织特异性重组酶工具鼠交配的子代就不单独命名了。
插入结构(上标)
对于基因敲除和条件性基因敲除,在命名中一般不加入插入结构的部分,即编号后紧跟实验室代号。
例如:Trp53tm1 Holl。
如果有敲入的基因,可以在括号内写出插入的外源基因。
例如:Cd19tm1(cre)Labcode 表示在 Cd19 基因中敲入 Cre 基因。
如果敲入的是 RNAi,那么把 RNAi 针对的靶点写进括号中。
例如: Genetm#(RNAi:Il23a)Labcode 。
实验室代号(上标)
一般实验室代号是机构名称的首字母缩写。
比如:
J 表示 The Jackson Laboratory;
Kyo 代表 Kyoto University ;
Smoc 代表上海南方模式生物;等等。
2. 随机转基因小鼠的命名
这一类小鼠的名称基本长这样:
命名中 Tg 代表 Transgene。
转入基因
在括号中填入转入的基因的启动子信息以及 Gene Symbol。
编号
指该实验室制备的转基因 founder 编号或系列编号。
如果使用转座子系统来制备转基因小鼠的话,那么命名时在 Tg 后面加上 Tn,表示 transposable element。随后的括号内,一般需要包括:所使用的转座子系统缩写,以及构建的载体结构,两者用「-」链接:TgTn(transposon_class_abbreviation-vector)#Labcode。
例如:B6.Cg-TgTn(sb-lacZ,GFP)IF2Jtak/JtakRbrc,其中 sb 是 sleeping beauty 的缩写。
知道了基因工程小鼠的命名规则,你可能又要问了,名字这么长总不能每次都写全名吧?
确实,通常在文章中对所用的基因工程小鼠进行表述时,我们可以采用简写的方式。具体可以怎么写呢?
基因工程小鼠的一般简写方式
A 基因敲除
大家很熟悉了,可以分别用加、减号上标来表示 wildtype allele 与 mutant allele:
KO 纯合子 Gene-/-
KO 杂合子 Gene+/-
野生型对照 Gene+/+ 或 WT (wildtype)
B 基因敲入
将敲入的元件写在上标里,例如:
Shh 基因 E177A 点突变杂合子:ShhE177A/+
如果 Shh 基因敲入报告基因或 Cre 重组酶基因,可以写成 ShhEGFP/+,或者也可以直接写成 Shh-EGFP、Shh-Cre。
C 转基因
一般直接写出表达的基因结构,例如:
Villin promoter 驱动 EGFP 报告基因的转基因小鼠就可以表示为 Vil-EGFP。
D 条件性基因敲除
将 flox 作为上标表示,比如:
CKO 纯合子 Geneflox/flox 或 Genef/f
CKO 杂合子 Geneflox/+ 或 Genef/+
如果与广泛表达 Cre 或生殖系表达 Cre 工具鼠交配后获得了全身敲除的小鼠,那么可以按 KO 小鼠的规则来简写。
如果与组织特异性 Cre 小鼠交配,那么可以组合写成:Geneflox/flox;Cre。
如果文章中只用到一种组织特异性 Cre 工具鼠,也可以按 KO 的方式简写,即 Gene-/- 可以表示 flox 纯合子且 Cre 阳性小鼠。
如果有多种不同的 Cre,那么就需要分别表示了。
例如:Tlr5 flox 小鼠分别与小肠上皮细胞(IEC)特异性 Cre(Vil-Cre)、 DC 细胞特异性 Cre(CD11c-Cre)交配的子代中发生基因敲除的纯合子小鼠可以分别表示为 Tlr5flox/flox;Vil-Cre 和 Tlr5flox/flox;CD11c-Cre。如果觉得这样写太麻烦,也可以这样表示:Tlr5ΔIEC 和 Tlr5ΔDC。
文章来源南模生物,更多技术资料详见:http://c.biomart.cn/modelorg/animal