历史进行到以 Louis Ignarro 为首的第三代药理学家时期，有条件的实验室出现了，他们终于证明了内皮源性舒张因子就是一氧化氮。（就像克里克跟沃森提出 DNA 是双螺旋结构的设想一样，光有设想是不够的，需要有技术条件的实验室拍摄到双螺旋结构的X光晶体衍射图才最终证实 DNA 的双螺旋结构。）
1986 年 7 月 11 日在美国明尼苏达州罗切斯特市举办的血管舒张专题研讨会上，Louis Ignarro和Salvador Moncada 两个研究组分别报告了各自的研究成果，不约而同地指出内皮舒张因子和一氧化氮之间具有惊人的相似性，认为它们是同一种物质。
Ignarro 接着总结道，经过一系列辉煌的实验研究之后，我们可以肯定的说，内皮源性舒张因子就是一氧化氮。他首次展示了氧合血红蛋白以相同的方式抑制内皮依赖性和一氧化氮诱导的血管舒张。
接着，他展示了内皮舒张因子和一氧化氮通过相同的血红素依赖机制激活可溶的鸟苷酸环化酶，然后，他证明邻苯三酚通过超氧阴离子激活后能够明显抑制内皮源性舒张因子和一氧化氮的环磷酸鸟苷累积效应。
最后，Ignarro 展示超氧化物岐化酶能够增强内皮源性舒张因子和一氧化氮的舒张效应和环磷酸鸟苷累积效应。